Recobrado de Pseudomonas syringae pv. tabaci a partir de semillas de tabaco infectadas

Resumen

Las semillas de tabaco constituyen una vía importante para la diseminación de Pseudomonas syringae pv. tabaci. Se ensayó un procedimiento para el recobrado de la bacteria a partir de semillas inoculadas, que consistió en su extracción en buffer PBS, seguido de la centrifugación del sobrenadante, siembra en el medio de cultivo King B e inoculación del líquido recobrado por infiltración en hojas de tabaco. Para estudiar la sensibilidad del método se confeccionaron muestras de trabajo constituidas por diferentes cantidades de semillas inoculadas y sanas para complementar a un gramo. A partir de la muestra de semillas inoculadas solamente se recobró la bacteria con un promedio de 196,6 colonias por placa (10⁷ ufc/mL). En los tratamientos que contenían semillas infectadas desde 0,5 hasta 0,1 g, se detectaron niveles altos del patógeno, en el rango de 10⁶-10⁵ ufc/mL. En las hojas de tabaco la concentración bacteriana de 10⁷ ufc/mL provocó una necrosis circundada de halo clorótico a las 24 h, las concentraciones en el rango de 10⁴ ufc/mL dieron lugar a clorosis y expansión de la infección a los tres o cuatro días. Las lesiones correspondientes a las poblaciones inferiores (10³-10¹) aparecieron entre 10 y 15 días en forma de pequeñas manchas húmedas y clorosis ligera. Fue posible detectar la presencia de Pseudomonas syringae pv. tabaci en las semillas, por siembra en medio de cultivo, en concentración de hasta 10³ ufc/mL y con la infiltración de las hojas de tabaco, en diluciones inferiores (10^–2-10^–1) no fue posible aislar colonias de la bacteria.